Buněčnou selekci

buněčnou selekci

Volba buněk je založeno na vysoké variabilitě populace somatických buněk, amplifikace variace za použití různých mutagenů a vyvinout selektivní systémy pro identifikaci a výběr klonů geneticky modifikovaných buněk (mutantu, rekombinantu a další.). Vzhledem k majetku totipotencí buněk regenerovat celé rostliny.

Spontánní mutace v populacích buněk jsou vzácné, tak pro zvýšení frekvence mutací se používá indukované mutageneze. Příprava mutantních forem s použitím selekce na buněčné úrovni, se skládá z následujících fází: 1) ošetření suspenze buněk nebo mutagen protoplastov- 2) převedení suspenze do selektivní conditions- 3) získání vyvíjející koloniy- 4) Výběr změněn rezistentní na selektivní faktor klonov- 5) indukce organogeneza- 6) regeneraci modifikované rostliny.

Způsob následující výběru buňky: kukuřice linie rezistentní k gelmintosporiozu- bramborový řádek: fitoftore- rezistentních rostlin tabáku rezistentních na virus tabákové mozaiky. vyrobené mutanty se zvýšenou syntézu esenciálních aminokyselin v buněčné kultuře. Takto vybraná umírá mrkev a tabákových buněk syntetizovat 20-30 krát více volného tryptofanu ve srovnání s původními mateřských kultur. Tato metoda produkoval množství buněčných linií brambor, mrkev, rýže, které jsou schopné supersynthesis lysin, methionin, prolin, fenylalanin, glycin. To je ten pravý způsob, jak vytvořit rostliny s vysokým obsahem aminokyselin, zejména esenciálních. Použití různých selektivních systémů může vést, jehož cílem je výběr na různé ekonomicky cenných vlastností, jako je odolnost proti herbicidům, onemocnění, různých stresových faktorů (slanosti, záplavy, nízkou a vysokou teplotou, atd).

U mutantů, v každém případě je třeba vytvořit systém výběru a prokázat genetické povahy modifikovaných buněčných linií. Výsledné změny nejsou vždy spojeny s mutacemi, a je možné nosit modifikací a nedědí. Doklad o mutace je kombinací těchto kritérií: 1) frekvenci spontánně pozměněných buněk musí být velmi nizka- 2) je výrazně lepší, když mutagenov- 3) změněné buňky schopné dělení a dlouhé zeleniny 4) stabilita modifikované funkce je zachována v nepřítomnosti selekčního tlaku-5 ) ukázala, že změněný genový produkt (morfologické a biochemické markery).

Účinnost mutagen v tkáňové kultuře je zvýšena haploidního úrovni vzhledem k manifestaci recesivních mutací v prvních generací, stejně jako v kultuře protoplastů z důvodu jejich jednotnosti pro izolaci homogenních tkání. Zvláště slibný zdroj separace různých mutací jsou protoplasty haploidní rostliny.

Mutageneze a selekce buněk, jak v somatických a zárodečných buněk jsou efektivní metody výroby geneticky modifikované formy a nové odrůdy rostlin.

V důsledku genetické variability in vitro vzniknout somoklonalnye provedení - rostliny, které se odchylují od mateřského typu. Variabilita Somoklonalnaya má několik důvodů: pohybující mobilní genetické prvky, inverze traslokatsii, delece, seřízení gen spojený s diferenciací, somatické přejet. Genetická variabilita v buněčné kultuře může být nejen genetické, ale epigenetické přírodě, to znamená, že vyplývá ze změn v genové akci.

Zvláště zajímavé jsou varianty somoklonylnye obilniny jako zdroj cenných genotypů. Pšenice linie se získají, ječmen, rýže, které se liší v takových vlastností je velmi konzervativní jako výšky rostliny, délka trnů, zbarvení zrnech uší, elektroforetické spektra náhradních proteinů. Možnosti Somoklonalnye byly úspěšně použity jako účinný zdroj variability ke zlepšení odrůd plodin.

Buněčnou selekci videa